附件4
改良奈氏试剂法定性测定食品、生物样品中氟乙酰胺
1 适用范围
适用于环境样品及部分生物样品(呕吐物和胃液和胃容物)中氟乙酰胺的定性测定，测定结果可作为初步判断事件性质的重要参考，不能作为确定事件性质的依据。氟乙酰胺的检测目前无国家标准分析方法，重大突发事件性质的判定，建议采用其他分析方法加以确证。
2 原理
氟乙酰胺水溶液遇到强碱性的奈氏试剂,逐渐水解出氨,与奈氏试剂作用,产生黄棕色沉淀。
3 方法重要参数
3.1 检出限：0.5μg。
3.2 干扰：铵盐存在假阳性干扰。
3.3 全程测定时间：20min。
4 器材与试剂
4.1 试剂奈氏试剂:11.5g碘化汞和8g碘化钾溶于少量水中,溶后加水稀释至50ml,再加入25%氢氧化钠50ml ,静置过夜,取上清液使用,贮于棕色瓶中。
4.2 阳性对照样品：5ml胃液中加50μg氟乙酰胺。
4.3 阴性对照样品：5ml胃液中加50μg溴鼠隆。
5 测定
5.1 样品处理
固体或半固体(胃内容物、呕吐物)样品,可采用有机溶剂直接提取法。一般常用甲醇或乙醇浸泡,在50℃水浴上温浸1h～2h。如用其他有机溶剂(乙酸乙酯、氯仿等)时,可在提取容器中充分振摇,然后过滤,滤液置60℃水浴上蒸发至近干,用适量甲醇溶解残渣(混浊时可过滤),溶液供检验用;液体样品(饮水、菜汤、饮料),可直接用氯仿等有机溶剂提取或用透析法处理,也可采用在水浴上蒸去水分后再用甲醇浸出。
5.2 测定
取处理后的样品水溶液1ml～2ml ,加奈氏试剂1ml～2ml ,如有氟乙酰胺,在滴加试剂约0.5min，观察颜色变化。如测定环境样品氟乙酰胺时同时与氟乙酰胺标准和水质等作对照。如测定胃液和胃容物中氟乙酰胺时，同时与阳性样品和阴性样品对照。
6 结果判定
阳性：淡黄色→黄色→亮黄色→深黄色，2min 后逐渐混浊，最后生成桔红色沉淀。
阴性：无颜色反应。
7 说明
7.1 如有铵盐存在，滴加试剂后立即生成桔红色沉淀。
7.2 对含量低的或含量高的样品要用几种检验方法来确证，以避免假阳性和假阴性，同时要以氟乙酰胺标准和水质等作对照试验，以便检查操作是否准确。
7.3 样品分离提取后，得到的毒物数量往往很少，而且常常又不能重复采样，为此，在试验前以消耗少量的样品进行预试验后，再进行确证试验。
苏公网安备