附件3:
碱化法定性测定碳氧血红蛋白
1 适用范围
用于一氧化碳中毒病人血中HbCO浓度的定性测定。
2 原理
一氧化碳中毒病人的血液与碱性试液混合后,液体颜色呈淡红色不变,无HbCO的正常人血液与试液混合物的颜色呈稻草黄色。
3 仪器和试剂
3.1 常规试管,吸管等。
3.2 蒸馏水。
3.3 NaOH溶液2.5mol/L(10%)。
4 方法
取试管2支,各加蒸馏水5ml,一支管加病人全血20µl混匀,另一支管中加健康不吸烟者的血20µl(阴性对照)。再将各管分别加入两滴NaOH溶液,立即混匀。
5 终点判定标准
将各管混匀后,判定本试验终点的开始时间为30s~lmin.并观察到5min。
5.1 颜色由粉红色立即转变为稻草黄色为阴性(-)。
5.2 由粉红色变为淡淡粉红色为可疑(±)。
5.3 粉红色持续一定时间为阳性(+)。
5.4 混匀后变为红色并持续一定时间为强阳性(++)。
6 说明
6.1应立即观察结果(开始观察时间30s~lmin),放置时间过长(5min以上)会影响观察结果的准确性。
6.2 同时采健康不吸烟者的血样作为阴性对照,与病人样品同时测定,比较结果。
6.3 急性一氧化碳中毒存活病人脱离中毒环境8h以上者,HbCO浓度一般不超过10%时,定性检测有可能出现阴性结果。
6.4 吸烟者血中碳氧血红蛋白的含量可达4%以上,连续吸烟完全可以使血碳氧血红蛋白呈现弱阳性结果。
6.5 血中大量的HbF(胎儿血红蛋白)会干扰,呈假阳性。本试验终点的开始时间为30s~lmin,并观察到5min。这样即可排除由于HbF含量增高造成的假阳性。