附件2
酶化学纸片法快速检测食品和呕吐物中
有机磷和氨基甲酸酯类农药残留量
1 适用范围
本方法适用于食品和呕吐物中有机磷和氨基甲酸酯类农药残留量的快速筛选测定。该方法定值是以限量的形式出现，仅供筛查，可用其它分析方法进一步确定具体农药品种和含量。
2 原理
有机磷及氨基甲酸酯类农药能抑制血液中胆碱脂酶活性，在正常的生理条件下，胆碱脂酶能使乙酰胆碱水解成醋酸和胆碱，因而pH值变低，当有机磷及氨基甲酸酯类中毒以后，血液中的胆碱脂酶活性受到抑制，乙酰胆碱水解成醋酸和胆碱的能力变低，而使pH值变高。根据pH值的变化，以溴麝香草酚兰为指示剂判断是否有机磷及氨基甲酸酯类中毒。
3 主要性能指标
检测灵敏度：(5～10)μg/10g样品
4 试剂
4.1 三氯甲烷（用10ml安瓿包装）。
4.2 溴水（或1ml安瓿包装）溶液：1ml饱和溴水加水4ml,混匀即成。
4.3 血清或干燥血清:马血清可直接使用,如果干燥马血清，可按瓶签上标明的情况加水稀释后用。也可使用健康人血清和鸭血清。
4.4 乙酰胆碱纸片：称取氯化乙酰胆碱1g，溴麝香草酚兰0.084g，溶于30ml95%乙醇。取定量滤纸，一张一张地浸泡在上述溶液中，取出晾干，剪成2cm×2cm的小方块备用。
5 分析步骤
取切碎试样10g左右于具塞三角瓶中，加三氯甲烷10ml～20ml，振摇数分钟过滤，取滤液1ml～2ml于蒸发皿中挥干，加水1ml用玻棒充分磨擦皿壁，使其充分溶解，如果是甲拌磷和对硫磷，则需加溴水氧化，然后用滴管吸取上述液体滴1滴（约0.05ml）于白磁板上，另加马血清1滴（约0.05ml）混合作用半分钟，加盖乙酰胆碱纸片一张，10min～20min后观察纸片颜色。同时用水作空对照试验。
6 结果判定
阳性结果：呈绿或蓝色
阴性结果：黄色。
7 注意事项
7.1 本法以pH值改变判断结果，应避免酸碱因素的干扰，白磁板用前清洗干净，吹干。
7.2 经试验马血清在冰箱中保存2年，其活性不影响测定结果，密封干燥马血清在低温保存2年其活性也不影响测定效果。
7.3 用溴水氧化甲拌磷和对硫磷后可提高灵敏度，以(1+5)饱和溴水1滴氧化1ml检液为宜。
7.4 乙酰胆碱试纸片应避光，干燥保存。
7.5 乙酰胆碱纸片最好使用氯化乙酰胆碱。
7.6 可使用符合以上要求的酶试剂条产品。
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